五分鐘完成粘末端連接？Fast-Link? DNA Ligation Kit，您值得擁有！
酶是生物體非常重要的一類蛋白質(zhì)，之前小達君給大家安利了Lucigen的RNase R（RNase R——RNase家族的“外貌協(xié)會成員”）和CircLigase? II ssDNA Ligase（“單鏈DNA環(huán)化連接酶——CircLigase? II ssDNA Ligase”），今天繼續(xù)給大家介紹一款特色的DNA連接酶，完整的DNA連接試劑盒可以讓您在5min內(nèi)完成DNA重組，一起來了解下吧~
Fast-Link? DNA Ligation Kit
Fast-Link? DNA Ligation Kit使用了高質(zhì)量的連接酶 (Fast-Link T4 DNA Ligase), 可提供快速高效的DNA連接，粘末端的連接可在室溫5分鐘內(nèi)完成。另外，在轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞前，與其他連接酶相比，F(xiàn)ast-Link? DNA Ligation Kit的連接產(chǎn)物不需要脫鹽，操作更簡便。
應(yīng)用
★ PCR產(chǎn)物的平末端和TA克隆
★ 測序接頭與平末端的連接
★ 基因組DNA的克隆和亞克隆
★ BAC/fosmid文庫構(gòu)建
★cDNA克隆
★ 接頭連接
|
Type of End |
Ligation Time |
% White Colonies |
Recombinants per μg DNA |
|
Overhang |
5 min. |
93 |
2.0 x 106 |
|
Blunt |
15 min. |
71 |
4.4 x 105 |
|
PCR product with 3′-A overhang |
1 hr. |
68 |
1.2 x 104 |
表1 Fast-Link?連接不同產(chǎn)物的測試數(shù)據(jù)
實驗結(jié)果
圖1. 使用Fast-Link? Kit粘末端連接的過程
按標準連接反應(yīng)使用2U Fast-Link? ligase進行Lambda Hind III markers連接(泳道2-6). 泳道M, 1-kb ladder;泳道1,無酶對照;泳道2-6, 分別為5 min, 15 min, 30 min, 1 hr, 2 hr連接結(jié)果。
圖2. 使用Fast-Link? Kit平末端連接過程
pUC 19 DNA用Pvu II消化，然后按標準連接反應(yīng)使用2U Fast-Link? ligase進行連接(泳道1-6). 泳道 M,1-kb ladder;泳道1,無酶對照;泳道2-6, 分別為5 min, 15 min, 30 min, 45min, 1 hr連接結(jié)果。
產(chǎn)品優(yōu)勢
★ 室溫五分鐘完成粘末端連接 (圖1)
★ 室溫15分鐘完成平末端連接 (圖2)
★在16℃下連接PCR產(chǎn)物(A端突出)，在1小時內(nèi)完成，高連接效率（表1）
★在轉(zhuǎn)入大腸菌感受態(tài)細胞前，快速連接反應(yīng)不需要脫鹽處理
★ 進行BAC連接，插入> 100 kb可在4小時內(nèi)進行，而不像其它的連接酶需要過夜反應(yīng)
產(chǎn)品內(nèi)容物
Fast-Link DNA Ligase (2 U/μL)
Fast-Link? 10X Ligation Buffer
ATP (10 mM)
說明書鏈接（請點擊閱讀原文）：https://www.lucigen.com/docs/manuals/MA086E-Fast-Link-Kits.pdf
產(chǎn)品信息
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分類 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
網(wǎng)站報價 |
品牌 |
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依賴ATP的DNA連接酶 |
LK0750H |
FAST-LINK? DNA LIGATION KIT |
50 rxns |
￥1,937 |
Lucigen |
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LK6201H |
FAST-LINK? DNA LIGATION KIT |
100 rxns |
￥3,172 |
Lucigen |
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依賴NAD+的DNA連接酶 |
A0102K |
Ampligase? DNA Ligase with Buffer |
2,500 U @ 100 U/μl |
￥3,406 |
Lucigen |
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A0110K |
Ampligase? DNA Ligase without Buffer |
10,000 U @ 100 U/μl |
￥8,827 |
Lucigen |
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A1905B |
Ampligase? 10X Reaction Buffer |
5 ml |
￥858 |
Lucigen |
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A3202K |
Ampligase? DNA Ligase with Buffer |
2,500 U @ 5 U/μl |
￥3,601 |
Lucigen |
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A3210K |
Ampligase? DNA Ligase without Buffer |
10,000 U @ 5 U/μl |
￥9,009 |
Lucigen |
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A32750 |
Ampligase? DNA Ligase with Buffer |
750 U @ 5 U/μl |
￥1,651 |
Lucigen |
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A8101 |
Ampligase? DNA Ligase Kit |
1,000 U @ 5 U/μl |
￥2,327 |
Lucigen |
品牌介紹
美國Lucigen公司成立于1998年，提供各類用于分子生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品，可以使研究者成功克隆較難克隆的基因，其在2016年收購了Illumina旗下Epicentre產(chǎn)品線。目前產(chǎn)品類別主要包括：體外轉(zhuǎn)錄、基因克隆（BAC克隆試劑盒）、感受態(tài)細胞（TG1噬菌體文庫構(gòu)建感受態(tài)）、體外擴增、轉(zhuǎn)座子突變、蛋白表達、文庫構(gòu)建等。
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